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1: 제 시간에 실험 용품을 교체하십시오.

뉴스812 (1) 

(NTC) 네거티브 컨트롤을 설정하고 여러 번 반복합니다.실험실에서 PCR 제품 오염이 발견되면 모든 실험 용품을 적시에 교체하십시오.예: 프라이머 재희석 및 준비, 피펫 팁, EP 튜브, ddH2O 등 재멸균, 새 피펫으로 교체, 일시적으로 다른 실험실을 빌려 PCR 실험 수행.오염된 실험실은 실험을 진행하기 전에 PCR 산물 오염이 제거될 때까지 환기 및 자외선을 조사해야 합니다.

2:UV 노출 시간 연장

뉴스812 (2)

DNA 오염을 제거하기 위해서는 정기적인 자외선 조사를 평소보다 2시간 연장해야 한다는 점은 주목할 만하다.그럼에도 불구하고 DNA 오염의 작은 조각(200bp 이하) 제거에 대한 UV 조사의 효과는 여전히 좋지 않습니다.

자외선 파장(nm)은 일반적으로 254/300nm이며 30분간 조사하면 충분하다.잔류 PCR 산물의 오염을 제거하기 위해 UV를 선택할 때 PCR 산물의 길이와 산물 서열의 염기 분포를 고려해야 한다는 점에 유의해야 합니다.UV 조사는 500 bp 이상의 긴 조각에만 효과적이며 짧은 조각에는 거의 영향을 미치지 않습니다.

UV 조사 중에 PCR 산물의 피리미딘 염기는 이합체를 형성합니다.이러한 이량체는 연장을 종료할 수 있지만 DNA 사슬의 모든 피리미딘이 이량체를 형성할 수 있는 것은 아니며 UV 조사도 이량체를 끊을 수 있습니다..이량체 형성 정도는 UV 파장, 피리미딘 이량체의 유형 및 이량체 부위에 인접한 뉴클레오티드의 서열에 따라 다릅니다.따라서 PCR 증폭 단편이 작을 경우 UNG anti-PCR 제품 오염 시스템을 사용하는 것이 좋습니다.

3:일반적으로 사용되는 DNA 오염 제거제

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에어로졸은 피하기 어려운 피펫을 추가할 때 쉽게 생성되며 빠르게 침전됩니다.따라서 DNA 오염의 확산을 방지하기 위해 특수 DNA 오염 제거제를 자주 사용하는 것은 의심할 여지 없이 좋은 선택입니다.

4:UNG 공해 방지 시스템 사용

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PCR 산물 오염이 제거된 후 검사실에서는 UNG anti-PCR 산물 오염 시스템을 사용하여 PCR 산물 오염을 방지할 수 있습니다.일반 실험실에서는 PCR product 오염 발생을 방지하기 위해 간단한 실험 분할, PCR product 영역을 다른 영역과 엄격하게 분리하고 특정 실험실 규칙 및 규정을 수립하고 관련 교육을 실시할 수 있습니다.

권장 사항: 합리적인 PCR 실험실 구축, 좋은 PCR 환경 유지, 표준 PCR 작업 절차 공식화 및 실험자의 엄격한 작업 인식 배양은 PCR 실험의 오염을 방지하거나 줄이는 열쇠입니다.


게시 시간: 2021년 8월 12일