실험 담당자의 행동을 표준화하기 위해 PCR 실험 SOP를 설정합니다.
실험자는 작업 절차를 엄격히 준수하며 인적 요인에 의해 발생할 수 있는 PCR 오염을 최소화하거나 오염 발생을 방지합니다.또한 실험자는 관련 장비의 운용 능력, 전체 작업 과정의 명확성, 오염 처리 방법 및 실험실 품질 관리 방법의 숙달, 테스트 결과의 정확한 해석 능력 등 해당 전문 지식과 기술을 갖추어야 합니다.
표준 PCR 실험실을 설정합니다.
PCR 실험실은 원칙적으로 시약 준비 영역, 시료 처리 영역, 증폭 영역 및 증폭 산물 분석 영역의 네 영역으로 나뉩니다.처음 두 영역은 사전 증폭 영역이고 마지막 두 영역은 증폭 후 영역입니다.사전 증폭 영역과 증폭 후 영역은 엄격하게 분리되어야 합니다.실험재료, 시약, 기록지, 펜, 세척재료 등은 증폭 전 영역에서 증폭 후 영역, 즉 시약 준비 영역 → 시료 처리 영역 → 증폭 영역 → 증폭 산물 분석 영역으로만 흐를 수 있으며 역류해서는 안 된다.실험실의 공기 흐름도 증폭 전 영역에서 증폭 후 영역으로 흐르고 역방향으로 흐르지 않아야 합니다.이상적인 PCR 실험실 설계는 다음과 같습니다.
그림 A: 완충실에서 음압이 있는 이상적인 PCR 실험실 설정 모드
그림 B: 완충실에서 양압이 있는 이상적인 PCR 실험실 설정 모드
그림 A와 그림 B에 제시된 PCR 실험실 설정 다이어그램은 보다 이상적인 설정 모드여야 하며, 조건이 있는 실험실은 이 모드를 참조하여 설계할 수 있습니다.일반 실험실의 경우 PCR 증폭 영역과 산물 분석 영역을 분리할 수 있으며, 시료 준비 영역과 PCR 증폭 영역은 커버의 개구부를 최대한 줄여야 합니다.유의사항: 제품 분석 구역에 있는 제품 및 실험 용품은 샘플 준비 구역 및 PCR 증폭 구역으로 반입하는 것을 엄격히 금지합니다.
검사실에서 PCR 검출 및 식별만 수행하는 경우 기존 PCR 대신 형광 정량 PCR을 사용하는 것이 좋습니다.
형광 정량적 PCR 검출 결과는 형광 신호로 수집 및 분석할 수 있으므로 반응 후 전기 영동을 위해 뚜껑을 열 필요가 없으므로 에어로졸을 형성하는 반응 생성물의 누출로 인한 PCR 생성물 오염을 방지합니다.겔 전기영동의 Loading 단계에서 캡 개구부 수를 늘리면 에어로졸 오염이 발생할 가능성이 있습니다.Quantitative PCR의 적용을 촉진하고 점차적으로 Qualitative PCR을 대체하는 것이 좋습니다.
UNG anti-PCR 제품 오염 시스템은 PCR 반응에 사용됩니다.
시스템은 dTTP 대신 dUTP를 사용합니다.PCR 반응 후 모든 PCR 산물(DNA 조각)은 dUTP와 통합됩니다.다음 단계의 PCR 반응에서 시스템에 첨가된 UNG 효소는 dUTP를 포함하는 모든 DNA 조각을 특이적으로 분해할 수 있는 PCR 전에 37°C에서 5분간 배양한 후 PCR 반응을 수행합니다.이를 통해 PCR 산물에 의한 에어로졸 오염을 완벽하게 제거할 수 있습니다.효과는 아래 그림과 같습니다.
참고: Direct PCR 시리즈의 경우 포진의 Anti-PCR 제품 오염 시스템의 시리즈 제품을 선택하실 수 있습니다.제안하다
대규모 유전자형 검사를 수행하는 실험실의 경우 합리적인 실험실 구축과 함께 시약 검사를 위해 UNG anti-PCR 제품 오염 시스템을 사용하는 것이 좋습니다.
알림: 이 시스템을 사용해도 이미 발생한 PCR 제품 오염은 제거할 수 없습니다.따라서 해당 시험 초기에는 UNG 시스템을 사용하고, PCR 증폭에는 UNG 시스템을 사용하여 PCR 산물의 오탐을 방지해야 합니다.
다음과 같은 대규모 검사 시에는 Foregene의 Direct PCR-UNG 시스템 사용을 권장합니다.
Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG;
Plant Seed Direct PCR Kit-UNG;
Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG;
Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG;
Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG。
Foregene의 키트 시리즈신속하고 대규모로 PCR 검출을 수행할 수 있을 뿐만 아니라 PCR 산물 오염을 효과적으로 방지하고 제어할 수 있습니다.
게시 시간: 2021년 3월 19일
