당신이 얼마나 알고

N 소개핵산 추출

정제된 핵산의 시작과 끝

처음부터 모든 것이 어렵다, 정제된 핵산이 가장

후속 실험을 위한 분자 실험의 시작

성공 또는 실패는 결정적인 영향을 미칩니다.

미량/초미량 UV 분광 광도계는 핵산 농도와 단백질 및 염 이온 잔류물을 간단하고 신속하며 경제적으로 검출할 수 있기 때문에 많은 과학 연구자들이 선호합니다.

아시다시피 A260은 핵산 흡광도 OD 값, A280은 단백질 농도 흡광도 OD 값, A230은 염 이온 농도 흡광도 OD 값을 의미하므로 A260은 핵산 농도를 환산할 수 있고, A260/280은 단백질 잔류물, A260/230은 염 이온 잔류물을 의미하지만 이는 연구자들이 수많은 측정 결과를 바탕으로 발견한 규칙일 뿐이며, "전통적인” DNA와 RNA의 순도를 설명할 수 있다고 믿는 것어느 정도.핵산 수율 및 순도를 식별하는 유일한 표준이 아니며 참고용으로만 사용되며 "황금 표준"이 아닙니다.

Thermo Fisher ND-2000 매뉴얼은 테스트 결과의 신뢰성을 강조합니다.

그 이유는 마이크로/울트라마이크로 UV 분광광도계를 이용하여 얻은 결과는 핵산의 수율과 순도만을 측면에서 반영하고 있고, 많은 영향을 미치는 요인(광 경로, 시료 부피, 시료 농도, pH 값, 흡광도 측정에 영향을 미치는 기타 이온 등)이 있기 때문에 측정된 OD 값이 반드시 정확하지는 않습니다.동시에 흡광도 측정 물질의 특이성 부족으로 인해 단일 가닥 DNA, 이중 가닥 DNA, RNA, dNTP 및 일부 단백질은 모두 260nm 파장에서 흡수 피크를 가지며 A260 단독으로 측정한 농도는 반드시 실제 DNA 또는 RNA가 아닙니다.농도, 그 무결성 및 저하를 판단할 수 없습니다.

그렇다면 정제된 핵산의 품질을 어떻게 판단할까요?검출을 위해 마이크로/울트라마이크로 UV 분광광도계를 사용하는 것 외에도 핵산의 순도와 무결성을 시각적으로 표시하고 농도를 어느 정도 표시하기 위해 아가로스 겔 전기영동과 같은 방법이 필요합니다.이와 같이 다양한 방법의 검출 결과에서 얻은 핵산 수율과 순도를 신뢰할 수 있습니다.

실험 차트 비교

H1299 cell의 genomic DNA는 A사의 DNA Extraction kit를 이용하여 추출하였으며 불순물 오염이 심하여 높은 OD 값을 나타내었습니다.

(OD 측정값 및 해당 전기영동도)

평가지표

핵산 수율 및 품질 테스트에 대한 "표준"이 있습니까?

우리가 아는 한 간단하고 빠르며 저렴한 방법은 없습니다.분광광도계, 겔전기영동, 질량분석법 등 모두 서로 다른 측면에서 용액의 핵산 농도와 순도를 반영하므로 서로를 참고하여 판단해야 한다.

최고의 평가 지표는 항상후속 실험 적용.역전사 및 PCR 증폭 효율에는 영향을 미치지 않습니다.신뢰할 수 있는 증폭 산물과 Ct 값을 얻고 시퀀싱을 통해 완전한 서열을 얻는 것이 성공적인 핵산 추출입니다.

요약하면, 비율만의 이론의 관점은 "우수한 추출 매개변수로 우수한 다운스트림 실험 결과 사용"이라는 관점에 의해 이의를 제기해야 합니다!

높은 DNA/RNA 순도를 얻기 위해 권장되는 Foregene DNA RNA 추출 키트:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/