소개:

RNA 분자는 단백질, DNA 및 RNA와 같은 다른 생물학적 분자와 광범위하게 상호 작용할 수 있으므로 거대 분자 복합체의 형태로 세포와 유기체에 존재합니다.그 중 RNA-단백질 복합체는 RNA의 존재와 기능에 중요한 형태 중 하나이다.RNA 풀다운은 RNA 분자, 특히 lncRNA 분자의 상호 작용 단백질을 스크리닝하고 식별하는 고전적인 방법이며 대다수의 연구자와 국제 권위 있는 학술 저널에서 인정하고 있습니다.오늘 FORREGENE은 RNA 풀다운의 실험 원리와 기술 과정을 여러분과 공유할 것입니다.

1. RNA 풀다운 기술의 실험 원리:

비오틴 표지된 표적 lncRNA 또는 lncRNA 단편(양성 및 음성 대조군으로 사용되는 RNA 단편 포함)의 시험관내 전사 및 합성, 세포 추출물과 함께 배양;RNA-단백질 또는 RNA-RNA 복합체를 수집하기 위해 avidin-anchored magnetic bead를 사용합니다. 철저히 세척한 후 복합체를 용출합니다.lncRNA와 상호작용하는 protein target molecule을 검출하는 경우 RNA-pull down product에 단백질 전기영동을 수행하여 silver staining으로 target protein을 검출하고 gel을 잘라 질량 분석을 합니다.또한 풀다운 제품에 대해 웨스턴 블롯 검증을 직접 수행합니다.lncRNA와 상호 작용하는 RNA 표적 분자의 경우 RNA-풀다운 제품을 RNA 추출하고 특정 qRT-PCR 검출을 수행합니다.

2. RNA 풀다운 기술 실험 과정:

3. FOREGENE의 RNA 풀다운 기술 서비스:

세포 배양

세포 총/핵/혈장 단백질 추출물의 제조

RNA 풀다운 실험

SDS-PAGE 전기영동, 은 염색

질량 분석 및 WB 실험

실험 보고서

4. 실험 사례

아래 그림은 FJ Bio-Bio의 RNA pull down과 SDS-PAGE 전기영동 검출 결과를 나타낸 것으로 빨간색 화살표는 차이 밴드를 표시한 것입니다.

Sichuan University의 Song Xu 교수 연구 그룹은 lncRNA 연구 분야에서 15년의 장기 축적을 축적했습니다.Foregene Bio와 Song Xu 교수 연구팀이 협력하여 lncRNA의 RNA pull down 기술을 출시하여 만족스러운 실험 결과를 얻을 수 있습니다.