실험실 테스트는 샘플 수집으로 시작되며 샘플 수집은 간과하기 가장 쉽습니다.검체 채취에서 가장 중요한 것은 올바른 검체 유형을 선택하고 적절한 검체 채취 도구를 사용하며 합리적인 운송 및 처리를 수행하는 것입니다.

I. 샘플 유형

일반적인 샘플 유형은 다음과 같습니다.

샘플링 방법은 농산물 무역(바자) 시장에서 신종 코로나바이러스의 환경 모니터링을 위한 기술 사양을 참조할 수 있습니다.”:

1. 시술자의 인후 면봉, 손, 옷 및 기타 물체에서 샘플을 면봉으로 채취: 바이러스 샘플링 튜브의 바이러스 보존 용액을 사용하고 샘플링 면봉에 완전히 침투해야 합니다.지면)을 반복 도포하고 3회 이상 헹군다.동시에 샘플링된 물체의 표면에서 다점 분포 샘플링을 수행할 필요가 있습니다.

2. 식품 표면 면봉 샘플: 식품 샘플은 직접 채취할 수 없습니다.수집할 식품은 조심스럽게 분리하여 면봉 샘플을 수집하기 전에 깨끗한 샘플링 백에 보관해야 합니다.바이러스 샘플링 튜브에 있는 바이러스 보존 용액을 사용하려면 샘플링 면봉을 충분히 적신 후 채취할 식품 샘플의 표면을 반복적으로 도말하고 헹구는 작업을 3회 이상 반복해야 합니다.동시에 샘플 표면에서 다점 분포 샘플링을 수행할 필요가 있습니다.

3. 하수 샘플: 시장의 배수 시스템 분포에 따라 내부 파이프 네트워크 수집, 물 흐름 방향의 하류 또는 도시 파이프 네트워크와의 연결에 중점을 둔 2-3개의 하수 샘플링 위치를 선택합니다.면봉 검체를 채취하기 위해서는 검체 채취 면봉으로 하수에 침지시켜 하수를 흡착하게 한 후 검체 채취관에서 3회 이상 헹군다.하수 샘플을 수집하려면 폴리에틸렌 플라스틱 병을 사용하여 30-500mL 하수 샘플을 수집합니다.부피가 500mL를 초과하는 하수 수집의 경우 폴리에틸렌 플라스틱 양동이 또는 현장 물 샘플 특수 농축 장비를 사용할 수 있습니다.동시에 하수 샘플링 위치에 대해 다지점 분산 샘플링을 수행할 필요가 있습니다.

4. 동물 검체: 살아있는 동물의 경우 체표 면봉, 구인두 면봉, 항문 면봉을 채취할 수 있으며, 배설물이나 분비물 검체도 채취하여 기록지에 기록할 수 있다.박피 등을 한 동물 시료의 경우 면봉을 사용하여 체표면 및 체강 면봉 시료를 채취합니다.바이러스 샘플링 튜브의 바이러스 보존 용액을 사용하여 샘플링 면봉을 완전히 침투시킨 다음 수집할 식품 샘플 표면의 적용을 반복해야 합니다.샤브샤브 3번 이상.동시에 샘플 표면에서 다점 분포 샘플링을 수행할 필요가 있습니다.

5. 기타 기구 : 우리나 어항 등 동물을 운반·사육하기 위한 용기먼저 용기에 보관 및 사육되는 동물의 특정 유형을 관찰하거나 이해하고 용기 내벽의 면봉 샘플 또는 내용물의 액체 샘플을 수집합니다.

6. 사람이 많이 모이는 곳, 환기가 잘 되지 않는 지역 상가, 사무실, 휴게실 등에서 에어로졸 시료를 채취합니다.

II.샘플링 도구
1. 채혈관
나중에 핵산 검사 및 항응고제 샘플을 수행해야 하는 경우 EDTA 항응고제를 포함하는 진공 혈관을 사용하여 혈액을 수집하는 것이 좋습니다.혈청 샘플의 경우 항응고제가 없는 진공 혈관을 사용하는 것이 좋습니다.

2. 샘플링 면봉

알긴산칼슘 면봉이나 나무 막대가 달린 면봉 대신 폴리프로필렌 면봉을 사용하는 것이 좋습니다. 특정 바이러스를 비활성화하고 PCR 검사를 억제하는 물질이 포함될 수 있기 때문입니다.면 머리가 있는 면봉은 면 섬유가 단백질 흡착력이 강하고 후속 보존액으로 쉽게 용출되지 않기 때문에 사용할 수 없습니다.

"새로운 코로나바이러스 핵산의 10-in-1 혼합 수집 및 검출을 위한 기술 사양"에서 "샘플링 면봉은 폴리에스테르, 나일론 및 기타 비면 및 비칼슘 알긴산염 재료로 만들어져야 하며 손잡이는 비목재 재료로 만들어져야 합니다.파단점은 면봉 헤드 상단에서 약 3cm 정도인데 부서지기 쉽습니다.”

미국 질병통제예방센터(CDC)도 “플라스틱이나 와이어 샤프트가 있는 합성섬유 면봉만 사용하라.알긴산칼슘 면봉 또는 나무 막대가 있는 면봉을 사용하지 마십시오.일부 바이러스를 비활성화하고 PCR 검사를 억제하는 물질을 포함할 수 있기 때문입니다.

현재 널리 사용되는 것은 플라스틱 막대와 결합된 일회용 멸균 나일론 플록킹 면봉입니다.무리를 짓는 면봉은 더 나은 수분 흡수 및 방출 속도를 가지고 있습니다.다른 샘플링 사이트에 따르면 면봉 헤드도 크기와 섬유가 다릅니다.두께.”

3. 샘플 운송 보존 솔루션

바이러스 불활성화 보존 용액: 적절한 양의 구아니딘 염 농도와 다양한 바이러스 용해 성분은 바이러스를 직접 용해하여 핵산을 방출하고, RNase 및 DNase를 비활성화하고, 후속 qPCR 검출에 사용할 수 있는 핵산의 무결성을 보장할 수 있습니다.바이러스 배양 및 분리에 사용할 수 없습니다.

바이러스 수송 및 보존 용액: 바이러스의 생존에 필요한 염류, 아미노산, 비타민, 포도당 및 단백질을 함유하여 바이러스의 활성을 유지할 수 있습니다.향후 바이러스의 핵산 추출 및 검출에 활용될 수 있으며, 바이러스의 배양 및 분리에도 활용될 수 있다.

4. 검체보존관 및 검체백

검체 저장 튜브는 핵산을 흡착하지 않는 스크류 캡이 있는 멸균 플라스틱 튜브여야 합니다.각 샘플 튜브는 샘플의 누출 및 오염을 방지하기 위해 샘플 백으로 덮어야 합니다.

III.시료 내 간섭 물질

PCR 실험에서 방해 물질

1. 내인성 간섭

신체 샘플에 존재하는 물질은 다른 물질의 검출을 방해할 수 있습니다.

피:헴(>1mg/ml), 헤민(>0.1ng/μl), 트리글리세리드, IgG 등;

오줌:우레아(20mM);

발판:식물 다당류, 콜레이트;

조직:프로테아제, 콜라겐;

우유: 프로테아제, 칼슘 이온;

약제: 항생제, 항바이러스제, 호르몬제 등

다른.

2. 외인성 간섭

그것은 체외에서 다른 물질의 검출을 방해할 수 있는 물질에서 나옵니다.샘플 수집 및 처리 중에 접촉할 수 있는 샘플 첨가제 및 물질:

테스트 용품: 혈청분리겔, 검체채취용기 및 고무마개, 카테터, 카테터플러싱액, 장갑분말 등

항응고제: 헤파린(>0.1U/mL), EDTA(>0.5mM) 등;

유기 용제: 이소프로판올(>0.1 IU/ml), 베타인, 디메틸 설폭사이드, 포름아미드, 글리세린, PEG 등;

소독제: 알코올(에탄올>1%), 알데히드, 페놀(페놀>0.2%), 과산화물, 강산(HCL), 강알칼리(NaOH) 등

세정제:SDS(>0.005%);

토양: 부엽토

염료: 인디고

다른.

환경 시료 채취와 같은 실제 야외 샘플링 조건에서 시료에는 다양한 간섭 물질이 포함될 수 있으며 각 위치의 간섭 물질 구성이 다르기 때문에 현지 조건에 따라 PCR 간섭 실험을 수행해야 합니다.

IV.샘플 보관 및 운송 조건

새로 수집한 임상 검체는 2°C~8°C에서 수집 후 2~4시간 이내에 실험실로 보내야 합니다.24시간 이내에 4℃에서 보관하십시오.바이러스 분리 및 핵산 검출에 사용되는 검체는 가능한 한 빨리 테스트해야 합니다.24시간 이내에 테스트할 수 있는 표본은 4°C에서 보관할 수 있습니다.24시간 이내에 검출되지 않는 검체는 -70°C 이하에서 보관해야 합니다.

요약:샘플의 표준화된 수집, 운송 및 보관은 후속 테스트에 필수적입니다.많은 실험실 테스트의 위음성은 바이러스 핵산의 분해로 이어지는 샘플의 부적절한 수집, 운송 및 보관으로 인해 발생합니다.그러나 많은 실험실은 여전히 ​​샘플링의 중요성을 무시합니다.이 기사가 샘플링에 대한 모든 사람들의 관심을 일깨우고 더 과학적이고 합리적인 샘플링을 할 수 있기를 바랍니다!

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