구강 면봉/FTA 카드 DNA 분리 키트 구강 면봉에서 게놈 DNA 추출 또는 정제 키트
키트 설명:
협측 면봉/FTA 카드 샘플에서 고품질 게놈 DNA를 신속하게 정제합니다.
◮RNase 오염 없음:키트에서 제공하는 DNA-Only Column은 실험 중 RNase를 추가하지 않고도 genomic DNA에서 RNA를 제거할 수 있어 실험실이 외인성 RNase에 오염되는 것을 방지할 수 있습니다.
◮빠른 속도:Foregene Protease는 유사한 프로테아제보다 높은 활성을 가지며 조직 샘플을 빠르게 소화합니다.조작이 간단하여 genomic DNA 추출 조작을 20~80분 이내에 완료할 수 있습니다.
◮편리한:원심분리는 상온에서 이루어지며, 4°C 저온 원심분리나 DNA의 에탄올 침전이 필요하지 않습니다.
◮안전:유기 시약 추출이 필요하지 않습니다.
◮고품질:추출된 게놈 DNA는 단편이 크고, RNA가 없고, RNase가 없으며, 이온 함량이 매우 낮아 다양한 실험의 요구 사항을 충족할 수 있습니다.
◮미세 용출 시스템:다운스트림 검출 또는 실험에 편리한 게놈 DNA의 농도를 증가시킬 수 있습니다.
설명
이 키트는 buccal swabs와 FTA Card(혈반)에서 고농도의 genomic DNA를 얻기 위한 효율적이고 빠른 방법을 제공합니다.우리 회사를 사용하여'당사 고유의 DNA 전용 실리카 멤브레인 스핀 컬럼과 포뮬라를 Foregene Protease와 결합하여 고농도, 고품질의 genomic DNA를 80분 이내에 추출할 수 있습니다.특별히 고안된 소형 정제 컬럼은 genomic DNA와 결합하여 적은 양으로도 DNA를 용출할 수 있습니다.15μl) elution system은 획득한 genomic DNA의 농도를 증가시켜 다운스트림 검출이나 실험에 편리합니다.키트는 한 번에 하나 이상의 시료를 처리할 수 있으며, 정제 과정은 페놀, 클로로포름과 같은 유기 물질의 추출과 시간이 많이 소요되는 이소프로판올 또는 에탄올 침전이 필요하지 않으며 작동이 간단하고 시간이 절약됩니다.
명세서
50 준비
키트 구성품
| 버퍼 ST1 |
| 버퍼 ST2 |
| 선형 아크릴아미드 |
| 버퍼 암호 |
| 버퍼 WB |
| 버퍼 EB |
| 포진 프로테아제 |
| DNA 전용 컬럼 |
| 지침 |
기능 및 장점
-No RNase 오염: 키트에서 제공하는 DNA-Only Column은 실험 중 RNase를 추가하지 않고도 genomic DNA에서 RNA를 제거할 수 있어 실험실이 외인성 RNase에 의해 오염되는 것을 방지합니다.
-빠른 속도: Foregene Protease는 유사한 프로테아제보다 활성이 높으며 샘플을 빠르게 소화합니다.간단한 조작.
-편의성: 원심분리는 상온에서 이루어지며, 4℃ 저온원심분리나 DNA의 에탄올 침전이 필요하지 않습니다.
- 안전성: 유기 시약 추출이 필요하지 않습니다.
-고품질: 추출된 게놈 DNA는 단편이 크고 RNA, RNase가 없고 이온 함량이 매우 낮아 다양한 실험의 요구 사항을 충족할 수 있습니다.
-Micro-elution 시스템: genomic DNA의 농도를 높일 수 있어 후속 검출이나 실험에 편리합니다.
키트 적용
다음 샘플에서 게놈 DNA를 정제하는 데 적합합니다: 협측 면봉, FTA 카드(혈액 얼룩).
보관 및 유효 기간
- 이 키트는 상온(15-25°C)의 건조한 조건에서 12개월 동안 보관할 수 있습니다.장기간 보관해야 하는 경우 2-8°C에서 보관할 수 있습니다.
참고: 저온에 보관하면 용액이 침전되기 쉽습니다.사용하기 전에 일정 시간 동안 상온에서 키트에 솔루션을 두십시오.필요시 37℃ 수조에서 10분간 예열하여 침전물을 녹인 후 혼합하여 사용한다.
-Foregene Protease 용액은 상온에서 장기간(3개월) 보관 시 활성을 나타내는 고유한 제형을 가지고 있습니다.4°C에서 보관하면 활성과 안정성이 더 좋아지므로 4°C에서 보관하는 것이 좋으며 -20°C에서 보관하지 마십시오.
정제 컬럼이 막혔습니다.
본 키트는 genomic DNA 추출 작업 시 원심분리 과정 없이 정제 컬럼이 시료 효소 용해 혼합물에 직접 흡착되며, 시료의 불완전한 효소화 및 높은 점도로 인해 정제 컬럼이 막힐 수 있습니다.
가능한 원인은 다음과 같습니다.
1. 조직 샘플의 불완전한 효소 소화.
권장사항: Foregene Protease의 시료 처리 시간을 적절하게 연장하거나 12,000rpm(~13,400 × g)에서 5분 동안 원심분리한 후 상층액을 채취할 수 있습니다.
2. 조직 샘플 또는 큰 조직의 과도한 사용.
권장 사항: 샘플에서 협측 면봉 1개를 초과하지 않는 것이 가장 좋습니다.샘플이 너무 크면 Buffer ST1, Foregene Protease, Buffer ST2의 용량을 적절히 늘립니다.
3. 샘플 점도가 너무 높습니다.
권장 사항: 샘플은 게놈 DNA 추출 전에 10mM Tris-HCl로 적절하게 희석될 수 있습니다.
4. 혈액 카드의 파편이 빨려 들어갔습니다.
권장사항: 혈액 반점(FTA 카드) 게놈 추출의 6단계 과도 원심분리 시간은 적절하게 연장될 수 있습니다.
낮은 수율 또는 DNA 없음
샘플 출처, 샘플 보관 조건, 샘플 준비, 조작 등을 포함하여 게놈 DNA 수율에 영향을 미치는 다양한 요인이 종종 있습니다.
추출 시 genomic DNA를 얻을 수 없습니다.
가능한 원인은 다음과 같습니다.
1. 샘플을 부적절하게 보관하거나 너무 오래 보관하면 게놈 DNA가 분해됩니다.
권장 사항: 구강 면봉은 가급적 갓 채취해야 하며 보존된 면봉을 게놈 DNA 추출 작업에 사용하는 것은 바람직하지 않습니다.혈반 샘플은 품질이 적합하고 보관 시간이 너무 길지 않아야 합니다.
2. 조직 사용량이 너무 적으면 해당 게놈 DNA가 추출되지 않을 수 있습니다.
권장 사항: 작동 가이드의 협측 면봉 샘플링 지침을 따르고 게놈 DNA 추출을 위해 구강 면봉에 충분한 세포가 부착될 수 있도록 가능한 한 많이 닦으십시오.혈반 샘플 추출을 위해 혈반 절단 영역을 적절하게 증가시킬 수 있습니다.
3. Foregene Protease가 부적절하게 보존되어 활성이 감소하거나 불활성화됩니다.
권장 사항: Foregene Protease의 보관 조건을 확인하거나 효소 반응을 위해 새로운 Foregene Protease로 교체하십시오.
4. 키트의 부적절한 보관 또는 보관 시간이 너무 길어 키트의 일부 구성 요소에 오류가 발생합니다.
권장 사항: 관련 시술을 위해 새로운 협측 면봉 DNA 분리 키트를 구입하십시오.
5. Buffer WB는 절대 에탄올을 추가하지 않습니다.
권장 사항: 버퍼 WB가 정확한 양의 무수 에탄올을 추가하는지 확인하십시오.
6. 용리액이 실리콘 필름에 올바르게 추가되지 않았습니다.
권장 사항: 65°C의 예열된 용리액 방울을 실리콘 멤브레인 중앙에 추가하고 실온에서 5분 동안 두어 용출 효율을 높입니다.
저수율 게놈 DNA 분리
가능한 원인은 다음과 같습니다.
1. 샘플을 부적절하게 보관하거나 너무 오래 보관하면 게놈 DNA가 분해됩니다.
권장 사항: 구강 면봉은 갓 샘플링하는 것이 바람직하며 보존된 면봉은 게놈 DNA 추출에 사용해서는 안 됩니다.
2. 조직 샘플의 양이 너무 적으면 추출된 genomic DNA 함량이 적어집니다.
권장 사항: 게놈 DNA 추출을 위해 충분한 세포가 구강 면봉에 부착될 수 있도록 가능한 한 많이 닦아 작동 가이드의 구강 면봉 샘플링 지침을 따르십시오.
3. Foregene Protease가 부적절하게 보존되어 활성이 감소하거나 불활성화됩니다.
권장 사항: Foregene Protease의 보관 조건을 확인하거나 효소 반응을 위해 새로운 Foregene Protease로 교체하십시오.
4. 용리액 문제.
권장 사항: 용출에는 Buffer EB를 사용하십시오.ddH를 사용하는 경우2O 또는 기타 용리액은 용출액의 pH가 7.0-8.5인지 확인합니다.
5. 용출액이 올바르게 적가되지 않습니다.
권장 사항: 실리콘 멤브레인 중앙에 용리액 방울을 추가하고 실온에서 5분 동안 방치하여 용출 효율을 높입니다.
6. 용출액이 너무 적게 축적됩니다.
권장 사항: 지침에서 요구하는 대로 genomic DNA 용출을 위한 용리액을 사용하십시오(적어도 15μl 이상).
낮은 순도의 게놈 DNA 분리
낮은 게놈 DNA 순도는 다음과 같은 다운스트림 실험의 실패 또는 만족스럽지 못한 결과로 이어질 수 있습니다.
가능한 원인은 다음과 같습니다.
1. 이종단백질 오염, RNA 오염.
분석: 정제 컬럼은 Buffer PW를 사용하여 세척하지 않았습니다.Buffer PW 세척 정제 컬럼이 올바른 원심 분리 속도를 사용하여 세척되지 않았습니다.
권장 사항: 에탄올을 추가하기 전에 상층액에 침전물이 없는지 확인하십시오.지침에 따라 정제 컬럼을 세척해야 하며 이 단계는 생략할 수 없습니다.
2. 불순물 이온 오염.
분석: Buffer WB 세척 정제 컬럼을 생략하거나 한 번만 세척하여 잔류 이온 오염을 초래했습니다.
권장 사항: Buffer WB를 지시에 따라 2회 세척하여 잔류 이온을 최대한 제거하십시오.
3. RNA 효소 오염.
분석: 외부 RNase가 버퍼에 추가되었습니다.버퍼 PW 세척 작업이 잘못되어 RNase 잔류물이 생성되어 시험관 내 전사와 같은 다운스트림 RNA 실험 작업에 영향을 미칩니다.
권장 사항: Foregene 시리즈 핵산 분리 키트는 RNase를 추가하지 않고도 RNA를 제거할 수 있으므로 구강 면봉/FTA 카드 DNA 분리 키트는 RNase를 추가할 필요가 없습니다.반드시 Buffer PW 세척 정제 컬럼의 지시사항을 따르셔야 하며, 이 단계는 생략할 수 없습니다.
4. 에탄올 잔류물.
분석: Buffer WB는 정제 컬럼을 세척한 후 빈 튜브 원심분리를 수행하지 않았습니다.
권장 사항: 지침에 따라 올바른 빈 튜브 원심 분리 작업을 수행하십시오.
5. 기타 불순물 오염.
분석: 저장된 샘플 또는 특수 샘플은 전처리되지 않습니다.
권장 사항: 지침에 따라 샘플을 철저하게 전처리하십시오.
