정제되지 않은 샘플 실시간 정량 PCR 직접 멀티플렉스 프로브 Qpcr Mix Plus U를 위한 2배 농축 프리믹스용 중국 제조업체
조직은 절차 개념 "과학적 관리, 고품질 및 효율성 우선권, 정제되지 않은 샘플 실시간 정량 PCR 직접 멀티플렉스 프로브 Qpcr Mix Plus U를 위한 2배 농축 프리믹스를 위한 중국 제조업체 최고 구매자"를 유지합니다.
조직은 절차 개념 "과학적 관리, 고품질 및 효율성 최우선, 구매자 최고를 위해 유지합니다.중국 Taq DNA 중합효소 및 Qpcr, 우리 회사는 풍부한 강점을 가지고 있으며 꾸준하고 완벽한 판매 네트워크 시스템을 보유하고 있습니다.우리는 상호 이익을 바탕으로 국내외 모든 고객과 건전한 비즈니스 관계를 구축할 수 있기를 바랍니다.
Real Time PCR 프라이머 설계 원리
정방향 프라이머 및 역방향 프라이머
Real Time PCR을 위해서는 프라이머 디자인이 매우 중요합니다.프라이머는 PCR 증폭의 특이성 및 효율성과 관련이 있으며 다음 원칙을 참조하여 설계할 수 있습니다.
- 프라이머 길이: 18-30bp.
- GC 함량: 40-60%.
- Tm 값: Primer 5와 같은 프라이머 디자인 소프트웨어는 프라이머의 Tm 값을 제공할 수 있습니다.업스트림 및 다운스트림 프라이머의 Tm 값은 가능한 한 가까워야 합니다.Tm 계산 공식도 사용할 수 있습니다. Tm = 4°C(G + C) + 2°C(A + T).PCR을 수행할 때 일반적으로 5°C의 프라이머 Tm 값 미만의 온도를 어닐링 온도로 선택합니다(어닐링 온도의 해당 증가는 PCR 반응의 특이성을 증가시킬 수 있음).
- 프라이머 및 PCR 제품:
- 디자인 프라이머 PCR 증폭 산물 길이는 바람직하게는 100-150bp이다.
- 템플릿의 2차 구조 영역에 있는 디자인 프라이머는 가능한 한 피해야 합니다.
- 업스트림 및 다운스트림 프라이머의 3' 말단 사이에 2개 이상의 상보적인 염기가 형성되지 않도록 하십시오.
- 프라이머 3' 말단 염기는 3개의 추가 연속 G 또는 C와 함께 존재할 수 없습니다.
- 프라이머 자체는 상보적인 구조를 가질 수 없으며 그렇지 않으면 헤어핀 구조가 형성되어 PCR 증폭에 영향을 미칩니다.
- ATCG는 프라이머 서열에 가능한 한 고르게 분포되어야 하며, 3' 말단 염기는 T로 피해야 합니다.
부록1：C엘다이렉트RT-정량 PCR 키트 구성품t 보충 팩
1.세포용해액
| 세포 용해 솔루션 | |||
| 키트 구성품 (24웰 용해 시스템/웰) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100T | 500T | ||
| 부분나 | 버퍼 CL | 20ml | 100ml |
| Foregene 프로테아제 플러스 II | 400μl | 1ml × 2 | |
| 버퍼 ST | 1ml × 2 | 10ml | |
| 부분II | DNA 지우개 | 400μl | 1ml × 2 |
| RT 믹스 | |
| 키트 구성품 (20μl 반응 시스템) | DRT-01011-B1 |
| 200T | |
| 5× 다이렉트 RT 믹스 | 800μl |
| RNase 프리 ddH2O | 1.7ml × 2 |
| qPCR 믹스 | ||
| 키트 구성품 (20μl 반응 시스템) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
| 200T | 1000T | |
| 2× 직접 qPCR Mix-Taqman | 1ml × 2 | 1.7ml × 6 |
| 20× ROX 참조 염료 | 40μl | 200μl |
| RNase 프리 ddH2O | 1.7ml | 10ml |
조직은 절차 개념 "과학적 관리, 고품질 및 효율성 우선권, 정제되지 않은 샘플 실시간 정량 PCR 직접 멀티플렉스 프로브 Qpcr Mix Plus U를 위한 2배 농축 프리믹스를 위한 중국 제조업체 최고 구매자"를 유지합니다.
중국 제조업체중국 Taq DNA 중합효소 및 Qpcr, 우리 회사는 풍부한 강점을 가지고 있으며 꾸준하고 완벽한 판매 네트워크 시스템을 보유하고 있습니다.우리는 상호 이익을 바탕으로 국내외 모든 고객과 건전한 비즈니스 관계를 구축할 수 있기를 바랍니다.
Real Time PCR 프라이머 설계 원리
정방향 프라이머 및 역방향 프라이머
Real Time PCR을 위해서는 프라이머 디자인이 매우 중요합니다.프라이머는 PCR 증폭의 특이성 및 효율성과 관련이 있으며 다음 원칙을 참조하여 설계할 수 있습니다.
- 프라이머 길이: 18-30bp.
- GC 함량: 40-60%.
- Tm 값: Primer 5와 같은 프라이머 디자인 소프트웨어는 프라이머의 Tm 값을 제공할 수 있습니다.업스트림 및 다운스트림 프라이머의 Tm 값은 가능한 한 가까워야 합니다.Tm 계산 공식도 사용할 수 있습니다. Tm = 4°C(G + C) + 2°C(A + T).PCR을 수행할 때 일반적으로 5°C의 프라이머 Tm 값 미만의 온도를 어닐링 온도로 선택합니다(어닐링 온도의 해당 증가는 PCR 반응의 특이성을 증가시킬 수 있음).
- 프라이머 및 PCR 제품:
- 디자인 프라이머 PCR 증폭 산물 길이는 바람직하게는 100-150bp이다.
- 템플릿의 2차 구조 영역에 있는 디자인 프라이머는 가능한 한 피해야 합니다.
- 업스트림 및 다운스트림 프라이머의 3' 말단 사이에 2개 이상의 상보적인 염기가 형성되지 않도록 하십시오.
- 프라이머 3' 말단 염기는 3개의 추가 연속 G 또는 C와 함께 존재할 수 없습니다.
- 프라이머 자체는 상보적인 구조를 가질 수 없으며 그렇지 않으면 헤어핀 구조가 형성되어 PCR 증폭에 영향을 미칩니다.
- ATCG는 프라이머 서열에 가능한 한 고르게 분포되어야 하며, 3' 말단 염기는 T로 피해야 합니다.
부록1：C엘다이렉트RT-정량 PCR 키트 구성품t 보충 팩
1.세포용해액
| 세포 용해 솔루션 | |||
| 키트 구성품 (24웰 용해 시스템/웰) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100T | 500T | ||
| 부분나 | 버퍼 CL | 20ml | 100ml |
| Foregene 프로테아제 플러스 II | 400μl | 1ml × 2 | |
| 버퍼 ST | 1ml × 2 | 10ml | |
| 부분II | DNA 지우개 | 400μl | 1ml × 2 |
| RT 믹스 | |
| 키트 구성품 (20μl 반응 시스템) | DRT-01011-B1 |
| 200T | |
| 5× 다이렉트 RT 믹스 | 800μl |
| RNase 프리 ddH2O | 1.7ml × 2 |
| qPCR 믹스 | ||
| 키트 구성품 (20μl 반응 시스템) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
| 200T | 1000T | |
| 2× 직접 qPCR Mix-Taqman | 1ml × 2 | 1.7ml × 6 |
| 20× ROX 참조 염료 | 40μl | 200μl |
| RNase 프리 ddH2O | 1.7ml | 10ml |
사용 설명서:
